紫外—可见分光光度分析法

一、基本要求 
掌握：本章要求掌握分光光度法的特点、基本原理、测定方法及计算方法；分子吸收光谱与电子跃迁类型，物质对光的选择吸收与吸收光谱曲线，摩尔吸收系数与吸收系数，吸光度与透光度，偏离朗伯-比尔定律的原因；掌握显色反应条件及光度测量条件的选择；掌握紫外—可见分光光度计的主要部件，各部件的作用及仪器原理，主要类型及特点；掌握差示分光光度法的原理、特点。
理解：物质分子结构与紫外吸收光谱的关系，吸收波长位移与分子结构变化的关系；紫外—可见分光光度定量分析影响结果准确度的各种因素。 
了解：了解紫外—可见分光光度法测定灵敏度和选择性的途径；双波长分光光度法等其它分光光度法定量测定的方法；紫外—可见分光光度法在有机化合物的结构解析方面的作用及在其他方面的应用。 
二、 基本概念与重点内容 
A概述 
1．紫外—可见分光光度法的特点 
灵敏度与准确度较高；选择性较好；设备简单、操作简便。 
2．分光光度法的发展过程 
目视比色法 光电比色法 分光光度法 
3． 分子的紫外—可见吸收光谱 
分子的紫外—可见吸收光谱是基于物质分子吸收紫外辐射或可见光，其外层电子跃迁而成，又称分子的电子跃迁光谱。紫外—可见分光光度法是基于物质分子的紫外—可见吸收光谱而建立的一种定性、定量分析方法。 
4． 光的基本性质 
5．物质对光的吸收及吸收光谱 
6．紫外—可见吸收光谱与电子跃迁类型 
7．生色团与助色团 
B 光的吸收定律 
1．光吸收的基本定律（朗伯-比尔定律） 
2．吸光度与透光率、百分透光率之间的关系 
3．工作曲线的绘制与应用 
4．吸光系数、摩尔吸光系数和桑德尔灵敏度 
5． 偏离朗伯-比尔定律的因素 
C紫外-可见分光光度计 
1． 分光光度计的主要部件 
2． 在紫外和可见光区进行测量时，分别选择何种光源 
3． 单色器的主要元件 
光栅；棱镜 
4． 分光光度计中的检测器类型 
早期：光电池；光电管；光电倍增管。 
5．紫外-可见分光光度计的类型及特点 
D显色测定试样的制备和光度测定条件的选择 
、 
1．显色反应及其影响因素 
2．测定读数误差和测定条件的选择 
5．入射波长的选择 
E 分光光度定量测定方法与其他应用 
1．单组分的测定 
通常采用 A-C 标准曲线法定量测定。 
2.多组分的同时测定 
3．紫外可见吸收光谱在有机化合物结构解析中的作用 
了解共轭程度、空间效应、氢键等；可对饱和与不饱和化合物、异构体及构象进行判别。在有机化合物结构解析中，紫外可见吸收光谱没有红外吸收光谱提供的结构信息多。 
4．紫外—可见吸收光谱中有机物发色体系信息分析的一般规律